什么是標記基因標記基因的分類
標記基因是對目的基因進行標志的工具,通常用來檢測目的基因在細胞中的定位。那么你對標記基因了解多少呢?以下是由學習啦小編整理關于什么是標記基因的內(nèi)容,希望大家喜歡!
標記基因的介紹
標記基因,原本是基因工程的專屬名詞,但是現(xiàn)在它已經(jīng)成為一種基本的實驗工具,廣泛應用于分子生物學、細胞生物學、發(fā)育生物學等方面的研究。
標記基因是一種已知功能或已知序列的基因,能夠起著特異性標記的作用。在基因工程意義上來說,它是重組DNA載體的重要標記,通常用來檢驗轉化成功與否;在基因定位意義上來說,它是對目的基因進行標志的工具,通常用來檢測目的基因在細胞中的定位。
標記基因的分類
引入“選擇基因”和“報告基因”的概念
選擇基因和報告基因都可以看做是標記基因,都起著標記目的基因是否成功轉化的作用,但是它們又有著各自的特點。
選擇基因(又稱選擇標記基因),主要是一類編碼可使抗生素或除草劑失活的蛋白酶基因,這種基因在執(zhí)行其選擇功能時,通常存在檢測慢(蛋白酶作用需要時間)、依賴外界篩選壓力(如抗生素、除草劑)等缺陷。而報告基因則是指其編碼產(chǎn)物能夠被快速測定、且不依賴于外界壓力的一類基因。
理想的報告基因通常具備如下基本要求:①、受體細胞中不存在相應內(nèi)源等位基因的活性;②、它的產(chǎn)物是唯一的,且不會損害受體細胞;③、具有快速、廉價、靈敏、定量和可重復性的檢測特性。目前常用的報告基因有氯霉素乙酰轉移酶基因(cat)、熒光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)等。
標記基因的舉例說明
1、“作為重組DNA載體的重要標記”舉例:大腸桿菌的某種質(zhì)粒具有青霉素抗性基因(該基因可以認為是標記基因),當這種質(zhì)粒與外源DNA組合在一起形成重組質(zhì)粒,并被轉入受體細胞后,就可以根據(jù)受體細胞是否具有青霉素抗性來判斷受體細胞是否獲得了目的基因。當人們用選擇培養(yǎng)基(比如含有青霉素的培養(yǎng)基),來培養(yǎng)受體細胞時,能夠在培養(yǎng)基中存活下來的受體細胞就可以認為是成功的導入了外源DNA,標記基因就起作用了。
2、“作為目的基因的細胞定位工具”舉例:通過將可定位檢測的標記基因(只要已知其序列,既可針對設計標記探針,從而對其進行細胞定位)與目的基因進行連鎖,當成功轉化目的基因,該基因同時又成功表達后,既可間接對其進行定位;或者已知目的基因(該基因本身就處于某細胞中)周邊序列,通過針對這些序列設計可插入標記基因,繼而對該標記基因進行檢測,也可間接對目的基因定位。
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